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如何大規(guī)模培養(yǎng)動物細(xì)胞（下）
更新時間：2021-09-23 瀏覽次數(shù)：3117
連續(xù)式培養(yǎng)
連續(xù)式培養(yǎng)是一種常見的懸浮培養(yǎng)模式，采用機(jī)械攪拌式生物反應(yīng)器系統(tǒng)。
理論上講，該過程可無限延續(xù)下去。連續(xù)培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是反應(yīng)器的培養(yǎng)狀態(tài)可以達(dá)到恒定，細(xì)胞在穩(wěn)定狀態(tài)下生長。穩(wěn)定狀態(tài)可有效地延長分批培養(yǎng)中的對數(shù)生長期。
在穩(wěn)定狀態(tài)下細(xì)胞所處的環(huán)境條件如營養(yǎng)物質(zhì)濃度、產(chǎn)物濃度、pH值可保持恒定，細(xì)胞濃度以及細(xì)胞生長速率可維持不變。細(xì)胞很少受到培養(yǎng)環(huán)境變化帶來的生理影響，特別是生物反應(yīng)器的主要營養(yǎng)物質(zhì)葡萄糖和谷氨酰胺維持在一個較低的水平，從而使它們的利用效率提高，有害產(chǎn)物積累有所減少。
然而，在高的稀釋率下，雖然死細(xì)胞和細(xì)胞碎片及時清除，細(xì)胞活性高，最終細(xì)胞密度得到提高，可是產(chǎn)物卻不斷在稀釋，因而產(chǎn)物濃度并不提高；尤其是細(xì)胞和產(chǎn)物不斷地稀釋，營養(yǎng)物質(zhì)利用率、細(xì)胞增長速率和產(chǎn)物生產(chǎn)速率低下。
由于是開放式操作，加上培養(yǎng)周期較長，容易造成污染，在長周期的連續(xù)培養(yǎng)中，細(xì)胞的生長特性以及分泌產(chǎn)物容易變異；
灌注式培養(yǎng)
灌注式培養(yǎng)，也稱灌流式培養(yǎng)，是連續(xù)式培養(yǎng)常見的方式。
(1)攪拌式生物反應(yīng)器
用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，這種反應(yīng)器必須具有細(xì)胞截流裝置，細(xì)胞截留系統(tǒng)開始多采用微孔膜過濾或旋轉(zhuǎn)膜系統(tǒng)，最近開發(fā)的有各種形式的沉降系統(tǒng)或透析系統(tǒng)。
(2)固定床或流化床生物反應(yīng)器
固定床是在反應(yīng)器中裝配固定的籃筐，中間裝填聚酯纖維載體，細(xì)胞可附著在載體上生長，也可固定在載體纖維之間，靠攪拌中產(chǎn)生的負(fù)壓，迫使培養(yǎng)基不斷流經(jīng)填料，有利于營養(yǎng)成分和氧的傳遞，這種形式的灌流速度較大，細(xì)胞在載體中高密度生長。
圖 01
片狀載體在生物反應(yīng)器上使用的一般流程
連續(xù)灌注培養(yǎng)是近年用于動物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)分泌型重組治療性藥物和嵌合抗體及人源化抗體等基因工程抗體較為推崇的一種方式。這種方法最大的缺點(diǎn)是污染幾率較高以及長期培養(yǎng)中細(xì)胞分泌產(chǎn)品的穩(wěn)定性、規(guī)模放大過程中工程問題。
針對這些使用生物反應(yīng)器培養(yǎng)細(xì)胞中的一些痛點(diǎn)，搏旅提供了一系列的解決方案，采用理念與技術(shù)，打造出一批批精品的生物反應(yīng)器，為客戶提供反應(yīng)器和技術(shù)服務(wù)。
圖 02
固流床細(xì)胞生物反應(yīng)器
細(xì)胞工廠培養(yǎng)
細(xì)胞工廠是一種設(shè)計(jì)精巧的細(xì)胞培養(yǎng)裝置。它在有限的空間內(nèi)利用了培養(yǎng)表面，從而節(jié)省了大量的廠房空間，并可節(jié)省貴重的培養(yǎng)液。
同時，與NUNC的細(xì)胞工廠操作儀結(jié)合使用，可全面實(shí)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)的自動化，從而大大地減低勞動強(qiáng)度和密集度。這套系統(tǒng)使用很方便，可產(chǎn)生類似塑料培養(yǎng)瓶的效果。
圖 03
細(xì)胞工廠系統(tǒng)