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如何大規(guī)模培養(yǎng)動物細胞（上）
更新時間：2021-09-18 瀏覽次數(shù)：3574
分批式培養(yǎng)
延滯期、對數(shù)生長期、減速期、平穩(wěn)期和衰退期。
分批培養(yǎng)的周期時間多在3-5d，細胞生長動力學表現(xiàn)為細胞先經歷對數(shù)生長期（48-72h)細胞密度達到最高值后，由于營養(yǎng)物質耗竭或代謝毒副產物的累積，細胞生長進入衰退期進而死亡，表現(xiàn)出典型的生長周期。
收獲產物通常是在細胞快要死亡前或已經死亡后進行。
圖 01
BioCore QC臺式細胞生物反應器
流加式培養(yǎng)
? 葡萄糖
葡萄糖是細胞的供能物質和主要的碳源物質，然而當其濃度較高時會產生大量的代謝產物乳酸，因而需要進行其濃度控制，以足夠維持細胞生長而不至于產生大量的副產物的濃度為佳。
?谷氨酰胺
谷氨酰胺是細胞的供能物質和主要的氮源物質，然而當其濃度較高時會產生大量的代謝產物氨，因而也需要進行其濃度控制，以足夠維持細胞生長而不至于產生大量的副產物的濃度為佳；
大規(guī)模培養(yǎng)中細胞凋亡主要由于營養(yǎng)物質的耗竭或代謝產物的堆積引起，如谷氨酰胺的耗竭是最常見的凋亡原因，而且凋亡一旦發(fā)生，補加谷氨酰胺已不能逆轉凋亡。
另外，動物細胞在無血清、無蛋白培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)時，細胞變得更為脆弱，更容易發(fā)生凋亡。
?氨基酸、維生素及其他
主要包括營養(yǎng)必需氨基酸、營養(yǎng)非必需氨基酸、一些特殊的氨基酸如羥脯氨酸、羧基谷氨酸和磷酸絲氨酸；此外還包括其他營養(yǎng)成分如膽堿、生長刺激因子。
添加的氨基酸形式多為左旋氨基酸，因而多以鹽或前體的形式替代單分子氨基酸，或者添加四肽或短肽的形式。在進行添加時，不溶性氨基酸如胱氨酸、酪氨酸和色氨酸只在中性pH值部分溶解，可采用泥漿的形式進行脈沖式添加；
其他的可溶性氨基酸以溶液的形式用蠕動泵進行緩慢連續(xù)流加。
圖 02
懸浮細胞生物反應器
半連續(xù)式培養(yǎng)
剩余的培養(yǎng)物可作為種子，繼續(xù)培養(yǎng)，從而可維持反復培養(yǎng)，而無需反應器的清洗、消毒等一系列復雜的操作。在半連續(xù)式操作中由于細胞適應了生物反應器的培養(yǎng)環(huán)境和相當高的接種量，經過幾次的稀釋、換液培養(yǎng)過程，細胞密度常常會提高。
圖 03
BioCore QF Pro不銹鋼微生物發(fā)酵系統(tǒng)